凍存細(xì)胞時,為什么需要程序降溫儀?
若常溫樣本直接向液氮低溫環(huán)境轉(zhuǎn)移,溫差大,細(xì)胞脫水快,易形成冰晶,對細(xì)胞膜、細(xì)胞器造成嚴(yán)重?fù)p傷。而程序降溫儀通過對降溫速率的控制,能有效減少細(xì)胞損傷,提高復(fù)蘇率。
程序降溫時,關(guān)鍵看哪幾點?
樣本在相變期內(nèi)的溫度控制很重要在被凍樣本由液態(tài)向固態(tài)變化的相變期內(nèi),會釋放一定的熱量。在這一期間,如果精準(zhǔn)控制好溫度,克服樣本溫度的回升,將會大大提高樣本成活率。
批次實驗時整個過程控制要穩(wěn)定程序降溫必須達到過程管控,統(tǒng)一化、規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化,這樣才能降低不同批次之間的冷凍差異。
液氮供應(yīng)量必須要充足完成一次冷凍所需的液氮量取決于樣本量、冷凍時間、環(huán)境溫度等因素,因此實時查看相關(guān)參數(shù)十分重要。